Diagnósticos em Biologia Molecular LTDA

VÍRUS DA HEPATITE C (HCV)
(GENOTIPAGEM)

1.INDICAÇÃO:
• determina o subtipo viral
• Avaliação do prognóstico
• Auxiliar da conduta terapêutica em pacientes crônicos
• Pacientes portadores do genótipo 1, principalmente 1b, apresentam doença mais grave e má resposta ao tratamento com Interferon.

2.AMOSTRA:
1,0 mL de SORO ou PLASMA em tubo estéril.
Após o sangue ser coletado, centrifugar a 1800 r.p.m., por 10 minutos, retirar 1,0 mL de soro e congelar imediatamente.

3.TRANSPORTE DA AMOSTRA:
Enviar a amostra em gelo seco o mais rápido possível.

4.PREPARO DO PACIENTE:

Não é necessário.

5.MÉTODO:

Transcrição Reversa seguida da Reação em cadeia pela polimerase. (RT-PCR) e posterior análise dos fragmentos após digestão com enzimas de restrição.

Limitações do método:

VALOR MÍNIMO DE CARGA VIRAL PARA QUE O EXAME POSSA SER REALIZADO > 600UI/mL. Amostras com valores inferiores podem fornecer um resultado inconclusivo.

IMPORTANTE: ESTE EXAME SÓ PODE SER FEITO SE O PACIENTE APRESENTAR UM EXAME RT-PCR QUANTITATIVO REALIZADO COM MENOS DE 30 DIAS.

6.OBSERVAÇÕES SOBRE EXAMES DE HEPATITE C:

• Os exames de HCV podem ser realizados por PCR “in house,” ou com o “kit” Amplicor da Roche. A outra técnica utilizada é o “branched” DNA (bDNA). Ambas as técnicas são confiáveis, entretanto, o acompanhamento deve ser feito através da mesma técnica utilizada nas etapas anteriores.
• O HCV apresenta 6 genótipos principais e subtipos denominados 1a, 1b, 1c, 2a, 2b, 2c, 3a, 3b, 4, 5, 6. O tipo 1, especialmente o 1a, oferece pior prognóstico e menor sensibilidade ao tratamento com interferon.

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