Diagnósticos em Biologia Molecular LTDA

VÍRUS DA HEPATITE C (HCV)
(Identificação por PCR – PCR QUALITATIVO)

1.INDICAÇÕES:
_Confirmação de infecção ativa após sorologia negativa ou duvidosa.
_Diagnóstico de infecção em pacientes imunossuprimidos, como em portadores de HIV ou transplantados, pois podem não produzir anticorpos de maneira eficiente.
_Detecção precoce de infecção por HCV pois independe da janela imunológica (o exame torna-se positivo após suspeita de exposição cerca de 1 a 2 semanas).
_Importante em doadores de sangue também devido ao fato de que independe da janela imunológica. Saliente-se que 50% dos doadores de sangue são falso positivo quando a pesquisa de anticorpo anti-HCV pelo método de ELISA é utilizada. Por outro lado, mulheres grávidas, pessoas vacinadas recentemente para influenza, portadores de hipergamaglobulinemia, presença de fator reumatóide e doenças reumáticas também dão falso-positivos no ELISA comum.

2.AMOSTRA:
1,0 mL de SORO OU PLASMA (EDTA) em tubo estéril.
Após o sangue ser coletado, deixar coagular, à temperatura ambiente, durante 20 minutos e centrifugar a 1800 r.p.m., por 10 minutos. Retirar 1,0 mL de soro e congelar imediatamente.

3.TRANSPORTE DA AMOSTRA:

Enviar a amostra congelada em gelo seco. A amostra pode permanecer na presença de células por 30 minutos. O plasma ou soro, em meio ambiente, permanece por 2 horas; refrigerado por 12 horas e congelado por 4 meses. A amostra pode ser rejeitada nas seguintes condições: amostra não congelada, amostra que tenha sofrido congelamento e descongelamento e amostra heparinizada.

4.PREPARO DO PACIENTE:
Não é necessário.

5.MÉTODO
Transcrição Reversa seguida de Reação em cadeia pela polimerase. (RT-PCR)

Limitações do método:

O resultado negativo não exclui a possibilidade de doença podendo significar apenas que a viremia está abaixo da sensibilidade do método.
Sensibilidade: 50UI/mL (corresponde a aproximadamente 100 cópias de RNA do HCV/mL).*

OBS: A DIFERENÇA ENTRE UI/mL E CÓPIAS/mL = ± 0,1log. (OMS)

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