VÍRUS DA HEPATITE C (HCV)
(Identificação por PCR – PCR QUALITATIVO)
1.INDICAÇÕES:
_Confirmação de infecção ativa após
sorologia negativa ou duvidosa.
_Diagnóstico de infecção em pacientes imunossuprimidos,
como em portadores de HIV ou transplantados, pois podem não produzir
anticorpos de maneira eficiente.
_Detecção precoce de infecção por HCV pois
independe da janela imunológica (o exame torna-se positivo após
suspeita de exposição cerca de 1 a 2 semanas).
_Importante em doadores de sangue também devido ao fato de que
independe da janela imunológica. Saliente-se que 50% dos doadores
de sangue são falso positivo quando a pesquisa de anticorpo anti-HCV
pelo método de ELISA é utilizada. Por outro lado, mulheres
grávidas, pessoas vacinadas recentemente para influenza, portadores
de hipergamaglobulinemia, presença de fator reumatóide
e doenças reumáticas também dão falso-positivos
no ELISA comum.
2.AMOSTRA:
1,0 mL de SORO OU PLASMA (EDTA) em tubo estéril.
Após o sangue ser coletado, deixar coagular, à temperatura
ambiente, durante 20 minutos e centrifugar a 1800 r.p.m., por 10 minutos.
Retirar 1,0 mL de soro e congelar imediatamente.
3.TRANSPORTE DA AMOSTRA:
Enviar a amostra congelada em gelo seco. A amostra pode permanecer na
presença de células por 30 minutos. O plasma ou soro,
em meio ambiente, permanece por 2 horas; refrigerado por 12 horas e
congelado por 4 meses. A amostra pode ser rejeitada nas seguintes condições:
amostra não congelada, amostra que tenha sofrido congelamento
e descongelamento e amostra heparinizada.
4.PREPARO DO PACIENTE:
Não é necessário.
5.MÉTODO
Transcrição Reversa seguida de Reação em
cadeia pela polimerase. (RT-PCR)
Limitações do método:
O resultado negativo não exclui a possibilidade de doença
podendo significar apenas que a viremia está abaixo da sensibilidade
do método.
Sensibilidade: 50UI/mL (corresponde a aproximadamente 100 cópias
de RNA do HCV/mL).*
OBS: A DIFERENÇA ENTRE UI/mL E CÓPIAS/mL
= ± 0,1log. (OMS)
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