HBV – TESTE DE RESISTÊNCIA AOS ANTIVIRAIS

1.INDICAÇÃO:
Diagnóstico precoce de resistência às drogas em casos de pacientes que não respondem ao tratamento com lamivudina ou fanciclovir decorrente de mutações na DNA polimerase; ocorre geralmente nas terapias prolongadas.
Método auxiliar na avaliação do tratamento de pacientes portadores de HBV.
• Principais mutações do HBV detectadas pela técnica:
L528M-reduz em 18 vezes a sensibilidade à lamivudina e 3 vezes ao fanciclovir.
M552V-reduz em 150 a 300 vezes a sensibilidade à lamivudina.
M552I- reduz de 10000 vezes a sensibilidade à lamivudina.
Todas estas mutações são no gene da DNA polimerase viral.

2.AMOSTRA:
1,0 mL de SORO em tubo estéril e congelar imediatamente após obtenção.

3.TRANSPORTE DA AMOSTRA:
Enviar a amostra congelada, em gelo seco. A amostra pode permanecer por 6 horas à temperatura ambiente, por 3 dias entre 2 a 8 ºC após a remoção das células ou congelada durante 4 meses. A amostra pode ser rejeitada nas seguintes condições: amostra não congelada,amostra que tenha sofrido congelamento e descongelamento e amostra heparinizada.

4.PREPARO DO PACIENTE:
Nenhum.

5.MÉTODO:
Reação em cadeia pela polimerase. (PCR), seguida de análise por enzima de restrição
Limitações do método:
Para realização do teste é necessário uma viremia =1000 cópias/mL de soro.

5.VALOR DE REFERÊNCIA:

Negativo: DNA de HBV não detectado por PCR.
Positivo: DNA do HBV detectado por PCR

OBS: A exemplo dos demais exames laboratoriais, o resultado deve ser interpretado em conjunto com os dados clínicos e outros exames.

IMPORTANTE: SÓ SE REALIZA ESTE EXAME APÓS UM PCR QUANTITATIVO

6.OBSERVAÇÃO SOBRE EXAMES DE HEPATITE B
• Os exames de HBV e HCV podem ser realizados por PCR “in house,” ou com o “kit” Amplicor da Roche. A outra técnica utilizada é o “branched” DNA (bDNA). Ambas as técnicas são confiaveis, entretanto, o acompanhamento deve ser feito através da mesma técnica utilizada nas etapas anteriores.

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